Выявление агглютиногенов системы Льюис в жидкой крови

В Институте судебной медицины путем иммунизации кроликов и коз мы получили гетероиммунные сыворотки системы Льюис (Судебно-медицинская экспертиза, 1962, № 4.). Одни из них обладали полными, другие — неполными антителами.

Сыворотки с полными антителами (агглютининами) имели более низкие титры, чем сыворотки с неполными антителами. Титр сывороток с полными агглютининами анти-Le^a был равен 1:8—1:16, в то время как титр тех же сывороток с неполными антителами достигал 1:64-1:128. Высота титра сывороток анти-Le^b колебалась в зависимости от группы системы АВО применяемых эритроцитов.

Сыворотки анти-Le^b, содержащие полные антитела, с эритроцитами Le^(b+) группы 0 имели титр 1:32, с эритроцитами группы А — 1:8 и с эритроцитами группы В — 1:16. Сыворотки анти-Le^b с неполными антителами соответственно обладали более высокими титрами: с эритроцитами Le(b+) группы 0 высота титра достигала 1 : 128, с эритроцитами группы А — 1 : 32 и с эритроцитами группы В — 1:64.

Следовательно, наиболее высокие титры сывороток анти-Ьеь отме­ чены с эритроцитами группы 0 и наиболее низкие — с эритроцитами группы А.

Приведенные данные согласуются с указаниями Диланея, Берд (Dilaney, Bird) и др., которые считают, что сыворотки анти-Le^b значительно лучше выявляют агглютиноген Le^(b+) в эритроцитах групп 0 и А2 и слабее или вовсе не обнаруживают его в крови группы А. Они считают, что агглютиноген А как бы препятствует развитию агглютиногена Le^(b+).

Полученные нами гетероиммунные сыворотки анти-Ьеа и анти-Ьеь имеют ряд преимуществ перед таковыми изо- и изоиммунными. В отличие от последних они обладают более высокими титрами, активны при комнатной температуре и сохраняют свои свойства при 4—8° в течение года (срок наблюдения).

Этими сыворотками исследовали кровь доноров на наличие агглютиногенов системы Льюис.

Определение проводили сыворотками анти-Le^a и анти-Le^b, содержащими полные и неполные антитела. Для выявления агглютиногенов этой системы в эритроцитах реакцию агглютинации проводили пробирочным методом. К 2 каплям сыворотки добавляли каплю 2% взвеси трипсинизированных или не обработанных трипсином исследуемых эритроцитов: первые — для сывороток с неполными антителами, вторые — с полными. Смесь центрифугировали 4 мин. при 750—1000 об/мин и встряхивали. Реакцию учитывали невооруженным глазом под микроскопом.

Обработку трипсином проводили добавлением к 1 объему трижды отмытых эритроцитов 1,5 объема 0,1% раствора трипсина. Смесь оставляли на 30 мин. в водяной бане при 37°, центрифугировали и после сливания надосадочной жидкости использовали, как указано выше.

Обработанные эритроциты отчетливо агглютинировались при наличии в сыворотках неполных антител.

Всего исследовали кровь 1073 доноров. Выявляли агглютиногены Le^(a+) , Le^(b+) и группу крови Le^(a-b-).

Каждый образец крови испытывали 4 сыворотками: двумя анти-Le^a и двумя анти-Le^b (с полными и с неполными антителами).

Как правило, реакция агглютинации эритроцитов была выражена значительно сильнее с сыворотками, обладающими неполными антите­ лами, имеющими значительно более высокие титры. В отдельных случаях слабовыраженный агглютиноген Le(b+) в крови группы А не удавалось открыть сывороткой анти-Le^b с полными антителами, тогда как сывороткой, содержащей неполные антитела, во всех случаях агглютиноген Le^(b+) определялся ясно.

В результате исследования этих образцов крови (см. таблицу) была выявлена группа Le^(a+b-) у 146 человек (13,6%), группа Le^(a-b+) — у 811 (75,6%) и группа Le^(a-b-) — у 116 (10,8%).

Распределение групп системы Лыоис в зависимости от групп изосе­ рологической системы АВО дано в таблице, из которой видно, что наиболее часто агглютиноген Le^(a+) наблюдается у лиц с группой крови А (15,9%) и АВ (14,1%), реже он выражен у доноров с группой крови 0 (12,1%).

Обратная картина наблюдается в отношении агглютиногена Le^(b+). Наиболее часто он выражен у лиц с группой крови 0 (80,5%), реже встречается в крови доноров, имеющих группу А (70,2%) и АВ (73,8%).

Группа Le^(a-b-), по нашим данным, чаще наблюдается среди лиц с группой крови А — в 13,9% и АВ — в 12,1%, тогда как лица с группой крови 0 имеют его лишь в 7,4%.

Распределение групп системы Льюис в зависимости от групп системы АВО

Представленные результаты согласуются с данными зарубежных авторов [Путконен (Putkonen); Сепих (Sepich); Андрезен (Andresen); Грубб (Grubb); Сэнджер (Sanger); Симмонс (Simmons) и др.]. По их данным, агглютиноген Le^(a+) у европейцев встречается от 13,7 до 25%. Содержание агглютиногена Le^(b+) обнаруживается в 64—74,8% [Андрезен, Брендемен (Brendemoen)] у лиц с группой крови 0 и лишь в 42% у лиц с группой крови А и АВ. Что касается группы Le^(a-b-) , то по данным Малассане (Malassanet), она достигает 37% среди населения Франции с группой крови А и 10% — с группой крови 0. По указаниям Андрезена, у датчан группа Le^(a-b-) встречается у 6% лиц с группой крови 0.

В литературе мы не нашли указания о распределении групп системы Льюис у населения СССР.

Выводы

Полученные нами гетероиммунные сыворотки анти-Le^a и анти-Le^(b хорошо выявляют агглютиногены системы Льюис в жидкой крови, выворотки с неполными антителами, имеющими более высокие титры, дают более сильную реакцию, чем сыворотки с полными антителами. Последние в единичных случаях не выявляют слабовыраженные агглютиногены системы Льюис.

Изосерологическая система Льюис может быть использована для судебно-медицинских целей (за исключением разрешения вопроса о спорном отцовстве, спорном материнстве и принадлежности ребенка тем или иным родителям, поскольку группы системы Льюис пока не поддаются генетическому анализу), при переливании крови и в антропологии.