Использование вертикального диск-электрофореза в полиакриламидном геле для определения групп гаптоглобина в жидкой крови
/ Орехова Т.А. // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 1976 — №1. — С. 43.
УДК 340.624.412:616.153.963.1-074:543.545
Республиканское бюро судебно-медицинской экспертизы Министерства здравоохранения Украинской ССР (нач. — доц.О. А. Грищенко), Киев
VERTICAL D1SC-ELECTROPHORESIS IN POLYACRYLAMIDE GEL FOR HP GROUPING IN LIQUID BLOOD
Orekhova T. A.
A technique is proposed for Hp grouping in blood serum. The Hp bands are sharply visible. Author recommends the method for practical use.
В биологическом отделении Республиканского бюро судебно-медицинской экспертизы Министерства здравоохранения УССР для определения групп гаптоглобина в сыворотке крови при экспертизах спорного отцовства, материнства и замены детей используется метод вертикального электрофореза в полиакриламидном геле.
Мы готовили 7,5% (либо 6%) мелкопористый гель по рецептам, изложенным в инструкции к прибору вертикального диск-электрофореза «Модель-69» производства фирмы «Реанал» (Венгерская Народная Республика). После полимеризации геля в течение * 30—40 мин в трубки наслаивали испытуемую сыворотку, предварительно соединенную с гемоглобином. Для большей концентрации белков сыворотки готовили на 40% растворе сахарозы с добавлением красителя бромфенолового синего. Испытываемые и контрольные донорские сыворотки наслаивали на гель в количестве 0,1 мл. В качестве электродного буфера использовали трисбуферный раствор с pH 8,3 (рецепт буфера изложен в инструкции к прибору). Электрофорез длился в течение 1 ч 20 мин при силе тока 40—60 мА (из расчета по 4 мА на каждую трубку).
Окрашивали извлеченный из трубок гель, опуская его в 0,5% раствор бензидина » 10% уксусной кислоте и добавляя в последующем 1 каплю пергидроля. Результаты учитывали в течение нескольких минут после окраски. Во всех экспертизах было получено четкое разделение полос, соответствующих фракциям гаптоглобина. Сомнительных результатов не наблюдалось.
При необходимости сохранения гелевых столбиков, окрашенных с помощь» бензидиновой реакции, они могут быть помещены в консервант (7% раствор уксусной кислоты, глицерин и др.) и сфотографированы.
Результаты проведенных исследований позволяют рекомендовать этот метод для практической работы 1.
1 Прим. редакции. Метод определения группы гаптоглобина путем диск-электрофореза в акриламидном геле был внедрен в практику Н.Н. Старостиным (Суд.-мед. эксперт., 1974. т. 17, № 3, с. 21). Автор занимался лишь апробацией этого способа.
похожие статьи
Определение групповой принадлежности изолированных клеток влагалищного эпителия / Локтева Р.В., Локтев А.И., Шишкина Ж.А., Курзин Л.М. // Избранные вопросы судебно-медицинской экспертизы. — Хабаровск, 2022. — №21. — С. 78-82.
Использование методики окрашивания препаратов раствором акридинового оранжевого при определении групповой принадлежности изолированных клеток с помощью реакции смешанной агглютинации / Локтева Р.В., Королева М.В., Панасенко С.В., Курзин Л.М. // Избранные вопросы судебно-медицинской экспертизы. — Хабаровск, 2022. — №21. — С. 73-78.
Метод избирательной абсорбции при определении кровяных групп в кровяных пятнах / Серебряников П. // Судебно-медицинская экспертиза. — М.: Изд-во Наркомздрава, 1928. — №8. — С. 3-7.
Судебно-медицинские экспертизы и исследования вещественных доказательств биологического происхождения в России (по материалам 2003—2017 гг.) / Ковалев А.В., Куприна Т.А., Самоходская О.В., Кондратова И.В. // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 2018. — №6. — С. 29-32.
Обнаружение эклипсных антигенов в трупной крови / Локтева Р.В. // Избранные вопросы судебно-медицинской экспертизы. — Хабаровск, 2019. — №18. — С. 127-131.