Количественное определение амитриптилина в трупном материале

/ Николаева Э.Г. // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 1978 — №3. — С. 34-37.

Николаева Э.Г. Количественное определение амитриптилина в трупном материале

Научно-исследовательский институт судебной медицины (дир.— проф. В.И. Прозоровский) Министерства здравоохранения СССР, Москва

УДК 340.67:615.214.32

Количественное определение амитриптилина в трупном материале. Николаева Э.Г. Суд.-мед. эксперт., 1978, № 3, с. 34-37.

Описан экстракционно-фотометрический метод количественного определения амитриптилина в трупном материале по комплексу с бромфеноловым синим. Метод позволяет определять от 68 до 87% препарата, добавленного в количестве 5 мг на 100 г органа. Чувствительность метода — 1 мкг амитриптилина в 1 мл исследуемого раствора. Таблица 1. Иллюстраций 3.

 

AMITRYPTILINE ESTIMATION IN AUTOPSY MATERIAL

E. G. Nikolayeva

A method of photometrical extraction based on the detection of amytriptiline by a bromphenolic complex is suggested. Detection range is 1 mkg of amitryptiline in 1 ml of the solution.

ссылка на эту страницу

За последние 10 лет зарубежные авторы предложили ряд методик количественного определения амитриптилина в водных растворах и биологических жидкостях (Wallace и Dahl, 1967; Facino 1968; Karen Worm, 1969; Westerlund, 1970; Breyer и Remmer, 1971; Faber и Mulder, 1974, и др.). Эти методы можно подразделить на флюориметрические, спектрофотометрические и газохроматографические. Низкая чувствительность методов (по данным авторов, чувствительность флюориметрических методов—100 мкг/мл, спектрофотометрических— 100—200 мкг/мл, газохроматографических— 10—100 мкг во вводимом объеме) исключает возможность их использования для судебно-химического анализа.

Рис. 1. Спектральные кривые комплексов амитриптилина с красителями.

Рис. 2. Зависимость экстракции комплекса амитриптилина с бромфеноловым синим от отношения компонентов.
По горизонтали: вверху — количество 0,001 М раствора бромфенолового синего (в мл); внизу — количество 0,001 М раствора амитриптилина (в мл)
.

 

Поэтому мы изучили возможность экстракционно-фотометрического определения амитриптилина. С этой целью исследовали ряд красителей (бромфеноловый синий, бромкрезоловый пурпурный, метиловый оранжевый). Комплексы амитриптилина с красителями получали при использовании ацетатного буферного раствора pH 4,05 и содержании амитриптилина 10 мкг в 1 мл хлороформного раствора. Спектры поглощения комплексов амитриптилина с красителями снимали на спектрофотометре СФ-4А в области 300—500 нм (рис. 1).

Наиболее отвечал нашим требованиям бромфеноловый синий (Е 1 см комплекса амитриптилина с бромфеноловым синим равняется 600, с бромкрезоловым пурпурным — 420, с метиловым оранжевым — 440).

Определяя методом изомолярных серий оптимальные условия образования и экстрагирования комплекса амитриптилина с бромфеноловым синим, установили, что максимальная абсорбция хлороформного экстракта комплекса наблюдается при pH 2,0 и отношении компонентов бромфеноловый синий — амитриптилин 19: 1 (рис. 2).

Методика. К 1 мл водного раствора амитриптилина в делительной воронке добавляли 9 мл ацетатного буферного раствора с pH 2,0, 4,2 мл 0,1% водного раствора бромфенолового синего и 10 мл хлороформа. Экстрагировали комплекс хлороформом при энергичном встряхивании воронки в течение 1 мин. Оптическую плотность окрашенного в лимонно-желтый цвет хлороформного экстракта измеряли на спектрофотометре СФ-4А при длине волны 420 нм в 10 мм кювете относительно хлороформа. Расчет количества амитриптилина производили по калибровочному графику, построенному для стандартных растворов амитриптилина с содержанием препарата от 10 до 200 мкг в 1 мл этилового спирта по описанной выше методике. Подчинение закону Бера наблюдается в пределах от 1 до 20 мкг в 1 мл исследуемого раствора. Чувствительность метода составляет 1 мкг препарата в 1 мл исследуемого раствора.

Определение амитриптилина этим методом можно проводить и на фотоэлектроколориметре (ФЭК-56М, кювета 10 мм, светофильтр № 3), но удельный коэффициент поглощения комплекса несколько ниже (E1 см =440).

Калибровочный график для определения амитриптилина по комплексу с бромфеноловым синим на спектрофотометре СФ-4А представлен на рис. 3.

 

Рис. 3. Калибровочный график для определения амитриптилина по комплексу с бромфеноловым синим на спектрофотометре СФ-4А.
По горизонтали — концентрация амитриптилина (в мкг/мл).

Определение амитриптилина в трупном материале (при добавлении 5 мг препарата на 100 г органа)

Орган Определение
амитриптилина
Среднее
значение,
%
мг %
Печень3,8577,079,0
3,8076,0
3,7074,0
4,1583,0
4,2084,0
4,0080,0
Почки3,5070,070,0
3,3567,0
3,2565,0
3,7575,0
3,6072,0
Желудок
с содержимым
4,5090,0 87,0
4,2585,0
4,1082,0
4,3086,0
4,6092,0
Сердце3,8577,078,0
3,8076,0
3,7074,0
4.1082,0
4,2084,0
Мозг3,2565,068,0
3,5070,0
3,4068,0
3,6072,0
3,2064,0
Тонкая кишка
с содержимым
3,4068,0 71,0
3,2565,0
3,6072,0
3,8076,0
3,7074,0

Для анализа брали по 100 г печени, желудка с содержимым, почек, кишечника с содержимым, сердца, мозга. Результаты проведенных исследований представлены в таблице. Для каждого органа ставили контрольные опыты, результаты которых были отрицательными.

Из таблицы следует, что при добавлении 5 мг амитриптилина к 100 г органа извлекается от 68 до 87% препарата.

Изолирование амитриптилина из свежего биологического материала производили спиртом, подкисленным щавелевой кислотой, по следующей схеме:

Описанный метод количественного определения использовали при доказательстве отравления амитриптилином.

Судя по обстоятельствам дела, 15-летняя девушка приняла около 30 таблеток амитриптилина, через 2 сут скончалась в больнице. Для судебно-химического исследования доставлены: желудок, тонкая кишка, мозг, печень, почки. Изолирование амитриптилина проводили по описанной выше схеме, обнаружение — путем исследования 1/4 части извлечения в тонком слое силикагеля КСК с использованием реакций окрашивания и в УФ-свете.

При количественном определении амитриптилина в 100 г органа в желудке с содержимым обнаружено 1,35 мг, в тонкой кишке с содержимым — 0,43 мг, в мозге — 0,55 мг, в печени — 3,8 мг, в почках — 0,94 мг амитриптилина. Отсюда следует, что при подозрении на отравление амитриптилином на исследование необходимо в первую очередь брать печень и желудок с содержимым.

Вывод

Разработан экстракционно-фотометрический метод количественного определения амитриптилина в трупном материале, позволяющий определять от 68 до 87% препарата.

похожие статьи

Перспективы использования параметров окислительной модификафии белков сыворотки крови для установления длительности агонального периода / Эделев И.С., Обухова Л.М., Андриянова Н.А., Эделев Н.С. // Судебная медицина. — 2019. — №3. — С. 28-32.

Обнаружение рокурония в биологических объектах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии / Матвеева А.А., Федорова К.В., Лопушанская Е.М., Киреева А.В. // Судебная медицина. — 2019. — №2. — С. 49-51.

Изучение распределения неостигмина метилсульфата в организме теплокровных животных после внутрижелудочного введения / Алехина М.И., Шорманов В.К., Никитина Т.Н., Маркелова А.М. // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 2019. — №2. — С. 40-47.

Обнаружение 25B-NBOMe — производного фенилэтиламина в биологическом материале / Барсегян С.С., Кирюшин А.Н., Ерощенко Н.Н., Туаева Н.О., Носырев А.Е., Кирилюк А.А. // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 2019. — №2. — С. 34-39.

Особенности распределения 2,4- и 2,6-ди-трет-бутилгидроксибензола в организме теплокровных животных / Шорманов В.К., Цацуа Е.П., Асташкина А.П. // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 2019. — №1. — С. 36-42.

больше материалов в каталогах

Судебно-химические исследования