Метод определения саррацина. зависимость экстракции от pH среды и природы органического растворителя

За последнее десятилетие в медицинскую практику вошли новые алкалоиды, обладающие значительной токсичностью. К их числу относится саррацин — один из алкалоидов рода крестовников, применяемый в виде гидротартрата при спастических колитах, спазмах мочевых путей и др.

Рис. 1. Калибровочная кривая для
количественного определения
саррацина с тропеолином 00.

Отсутствие в литературе каких-либо данных о методах анализа сарацина побудило нас заняться некоторыми из этих вопросов.

Многие алкалоиды в процессе изолирования извлекаются органическими растворителями из щелочных и кислых растворов. Влиянию pH среды на экстракцию некоторых алкалоидов органическими растворителями посвящен ряд работ (В.Ф. Крамаренко, и др.). В отношении саррацина таких исследований не проводилось.

Мы применили фотоэлектроколориметрический метод, основанный на реакции саррацина с тропеолином 00, который ряд авторов (В.Ф. Крамаренко;

В. Павлов и Т,. Барабаш, и др. ) использовал для определения кодеина, кокаина, хинина и атропина. Калибровочную кривую строили по методу В.Ф. Крамаренко (рис. 1). Отличием является то, что для разведения окрашенной хлороформной вытяжки тропеолината саррацина мы доводили последнюю хлороформом до 50 мл. Отсюда брали 5 мл жидкости, прибавляли 26 мл хлороформа, 3 мл 1%, раствора концентрированной серной кислоты в метиловом спирте. Интенсивность полученной окраски измеряли фотоэлектроколориметром ФЭК-56-2 (кювета 10, 050 мм, зеленый светофильтр).

Таблица 1

Количественное фотоэлектроколориметрическое определение саррацина в водных растворах по реакции с тропеолином 00

Примечание, а характеризует воспроизводимость метода, т — ошибку метода.

Рис. 2. График зависимости экстракции
саррацина от pH среды и природы
органического растворителя.
1 — хлороформ; 2 — дихлорэтан;
3 — бензол; 4 — эфир.

Чувствительность метода составляет 0,1 мг соли саррацина в конечном объеме. Метод можно использовать для количественного определения от 0, 1 до 5 мг саррацина в пробе. Экспериментальные данные, обработаны статистически (табл. 1).

Как видно из табл. 1, наилучшие результаты наблюдаются при концентрациях саррацина от 1, 0 до 5 мг в пробе.

Разработав метод количественного определения, мы перешли к изучению влияния pH и природы органического растворителя на степень экстракции саррацина из водных растворов. Для создания соответствующего pH применили универсальную буферную смесь Бриттона—Робинсона. Из растворителей использовали свежеперегнанный хлороформ (температура кипения 61°), 1, 2-дихлорэтан (температура кипения 83°), бензол (температура кипения 80°) и эфир (температура кипения 36°). Количество экстрагированного алкалоида определяли описанным выше фотоэлектроколориметрическим методом. Результаты исследований приведены в табл. 2 и на рис. 2.

Из табл. 2 и рис. 2 видно, что процент экстракции саррацина не зависит от pH среды и природы органического растворителя. Так, начало экстракции хлороформом наблюдается при pH 4, 0, дихлорэтаном и бензолом — при pH 5, 5—6, 0 (соответственно) и эфиром— при pH 6, 5.

Таблица 2

Зависимость экстракции саррацина от pH среды и природы органического растворителя (средние из трех измерений)

Примечание. D — оптическая плотность продукта взаимодействия саррацина(экстрагированного различными растворителями) с тропеолином 00.

Максимально саррацин экстрагируется при pH 9, 0—12, 0 хлороформом (93—95%) и pH 10, 0—12, 0 дихлорэтаном (89—90%), бензолом (86—89%) и эфиром (59—61%).

Выводы

1. На степень экстракции саррацина влияет pH среды и природа органического растворителя.
2. Максимальные количества саррацина экстрагируются хлороформом при pH 9, 0—12, 0 (93—95%), дихлорэтаном (89—90%) и бензолом (86—89%) при pH 10, 0—12, 0 и эфиром (59—61%) при pH 10, 0—12, 0.
3. Для определения количества экстрагированного саррацина применен после предварительного изучения метод, основанный на взаимодействии саррацина с тропеолином 00 и дальнейшем фотоколориметрировании продукта этого взаимодействия.