Модифицирующее влияние общего переохлаждения организма на морфофункциональное состояние печени при алкогольной интоксикации, вызванной интрагастральным введением этанола

Актуальность. Печень как центральный орган метаболизма, играющий большую роль в пластических и энергетических процессах, включается в адаптивно-компенсаторные реакции организма при всех экзогенных и эндогенных неблагоприятных воздействиях даже в тех случаях, когда повреждающие факторы не обладают выраженным гепатотропным эффектом. Комбинация действия экзогенных стрессоров различной природы на организм изучена недостаточно.

Цель. Установить модифицирующее влияние общего переохлаждения организма при температурах воздуха –10 ºС и –18 ºС на морфофункциональное состояние печени при алкогольной интоксикации, вызванной интрагастральным введением этанола в дозе 4 мл/кг.

Материал и методы. Для проведения эксперимента использовали беспородных половозрелых (в возрасте 3 мес) крыс-самцов массой 250–300 г. Животных содержали в клетках с опилками по 5 особей в лаборатории кафедры судебной медицины с курсом токсикологической химии СибГМУ при температуре +20 … +22 °С, с равными периодами светлого (8.00 – 20.00) и темного (20.00 – 8.00) времени суток при свободном доступе к воде и пище, одинаковой для всех крыс. Эксперимент проводился в осенне-зимний период. Время начала воздействия в каждой серии эксперимента - 8.00. Для моделирования алкогольной интоксикации животным под эфирным наркозом интрагастрально через зонд однократно вводился 40 % этанол в расчете 4 мл на 1 кг массы тела. Для моделирования гипотермии животных подвергали экспозиции холода в клетках по 2–3 особи на открытом воздухе при температуре –10 °С и –18 ºС. При моделировании комбинированного воздействия алкоголя и холода вначале животным вводили этанол, затем клетку с животными помещали на открытый воздух. Животных выводили из эксперимента путем декапитации под эфирным наркозом в течение 7 часов: через 1 час, 3 часа, 5 часов, 7 часов. Морфологическими признаками, по которым можно судить о функциональной активности печени, являются степень дистрофических изменений в гепатоцитах, степень кровенаполнения сосудов, выраженность очаговой и диффузной мононуклеарной инфильтрации, количество лимфоцитов в полях зрения, выраженность некроза, выраженность отека, количество двуядерных гепатоцитов, количество гепатоцитов с двумя ядрышками в ядре, а также размеры клеток, ядер, удельный объем органелл в цитоплазме гепатоцитов различных зон ацинуса. На светооптическом уровне на препаратах, окрашенных гематоксилином и эозином, оценка состояния печени была проведена по 4-балльной системе. В каждом случае были оценены: степень дистрофических изменений в гепатоцитах, степень кровенаполнения сосудов, выраженность очаговой и диффузной инфильтрации, количество лимфоцитов в полях зрения, выраженность некроза, выраженность отека, количество двуядерных гепатоцитов, количество гепатоцитов с двумя и более ядрышками в ядре. Статистическая обработка результатов была проведена с использованием пакета программ STATISTICA 10.0 с вычислением для каждой выборки среднего арифметического (М) и стандартной ошибки среднего арифметического (m). Для сравнительного исследования использованы непараметрические тесты Вилкоксона, Манна–Уитни. Сравнены морфологические и параметры между группами. Статистически значимыми результаты считались при p<0,05.

Результаты. Учитывая то, что первичным по хронологии действия стрессором из двух изучаемых является алкогольная интоксикация, то логично допустить, что общее воздействие холода на организм может вызвать модификацию морфологического состояния печени, вызываемую алкогольной интоксикацией. Это может быть связано, в первую очередь, с использованием этанола как источника энергии для поддержания теплового баланса ядра тела. Модификация влияния интоксикации, вызванной введением этанола в дозе 4 мл/кг массы тела, общей гипотермией проявляется в следующем. На светооптическом уровне (табл. 1) регистрируется ряд признаков в динамике комбинированного воздействия, которые позволяют сделать вывод о том, что более сильное охлаждение приводит с течением времени наблюдения к более выраженным деструктивным изменениям печени, чем менее сильное. Это проявляется в выраженности дистрофических изменений гепатоцитов. В свою очередь, гипотермия –10 ºС обладает явно протективным эффектом в отношении некротических изменений гепатоцитов, вызываемых этанолом. При этом независимо от температуры экспозиции холода кровенаполнение печени значимо выше, чем при моновоздействии этанола. Увеличение в динамике воздействия числа двуядерных гепатоцитов свидетельствует о более высокой функциональной активности печени при комбинированных воздействиях, нежели при монодействии алкогольной интоксикации.

Выводы. Таким образом, показано, что общее переохлаждение организма модифицирует морфофункциональное состояние печени при интоксикации этанолом в дозе 4 мл/кг массы тела, оказывая влияние, зависящее от температуры экспозиции холода.

Таблица 1

Модификация морфологических изменений печени при алкогольной интоксикации, вызванной введением этанола в дозе 4 мл/кг, общим переохлаждением организма при температуре –10 ºС и –18 ºС

Здесь:

Первая строка в ячейке – величина показателя при алкогольной интоксикации, вызванной введением этанола в дозе 4 мл/кг.

Вторая строка в ячейке – величина показателя при алкогольной интоксикации, вызванной введением этанола в дозе 4 мл/кг, и общем переохлаждении организма при –10 ºС.

Третья строка в ячейке – величина показателя при алкогольной интоксикации, вызванной введением этанола в дозе 4 мл/кг, и общем переохлаждении организма при –18 ºС.

* – Различия статистически значимы по сравнению с показателем в первой строке.

** – Различия статистически значимы по сравнению с показателем во второй строке.