Влияние внутримозгового введения гидролизата белка на образование преципитинов у внутривенно иммунизированных кроликов

/ Потапов М.И. // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 1958 — №2. — С. 19-21.

Потапов М.И. Влияние внутримозгового введения гидролизата белка на образование преципитинов у внутривенно иммунизированных кроликов

Научно-исследовательский институт судебной медицины (дир. — проф. В. И. Прозоровский) Министерства здравоохранения СССР, Москва

Поступила в редакцию 9/Ш 1958 г.

 

 

 

ссылка на эту страницу

Известно, что к преципитирующим сывороткам, применяемым в реакции Чистовича-Уленгута, предъявляются весьма высокие требования, которым отвечают сыворотки лишь части иммунизированных кроликов (по данным В.Я . Карякина, в 1/
случаев, по материалам П. Н. Косякова и М.Н . Резниковой, в 42,6%). В связи с этим возникает настоятельная потребность увеличить количество кроликов — продуцентов пригодной сыворотки. Нами проведены опыты неспецифической стимуляции процесса преципитинообразования. Предпосылкой послужили данные Г. X. Гильмановой об усиленной выработке столбнячного антитоксина у подкожно иммунизированных кроликов, которым в головной мозг вводился продукт гидролиза белка — питательная среда Глузмана, применяемая для получения столбнячного токсина.

Таблиц а 1

Титры преципитинов в сыворотках кроликов опытной группы

№ п/п Иммунизация Повторная иммунизация
титры преципитинов при пробе на
6-й день 8—9-й день 5-й день 8—9-й день

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

Среднее арифметическое титров

1 : 7 000

1: 10 000

1 : 10000

1 : 10000

1 : 5 000

1: 10 000

1 : 1 000

1 : 100

1 : 3 000

1:15 000

1 : 7 000

1 : 3 000

1 : 5 000

1 : 7 000

1:15 000

1 : 10000

1 : 7 000

1:500

. 7 000

1 : 5 000

1 : 15 000

1 : 7 000

1 : 10 000

1 : 5 000

1 : 15 000

1: 10 000

1 : 5 000

1 : 10 000

1 : 15 000

1 : 10 000

1 : 7 000

1 : 3 000

1: 15 000

1 : 15 000

1: 10 000

1 : 5 000

1 : 3 000

9 000

1 : 3 000

1 : 15 000

1 :500

1:15 000

1: 10 000

1 : 15 000

1 : 15 000

Пал

1 : 10 000

1 : 15 000

1 : 3 000

1:10 000

Пал

1 : 15 000

Пал

1 : 15 000

1 : 15 000

1 : 5 000

10 600

1 : 15 000

1 : 15 000

1 : 15 000

1 : 15 000

1 : 15 000

1 : 15 000

1 : 15 000

 

1 : 15 000

1:15 000

1 :300 0

1 :15000

 

1 :15 000

 

1 :15 000

1 :15 000

1 :15 000

14 200

Все опыты были проведены с одной партией среды Глузмана, полученной из Научно-исследовательского института вакцин и сывороток имени И. И. Мечникова, которая содержала 98 мг% аминного азота и 1,5% пептона; ее рН 7,2. По методу Робертс-Стольникова удалось уста­
новить, что в среде, приготовленной из говяжьего мяса,, содержалось 0,0198% белка, т. е. в 350 раз меньше* чем в нормальной бычьей сыворотке. Видовая принадлежность этого белка при помощи соответствующих преципитирующих белох сывороток не могла быть установлена, что исключало возможность образования в организме кролика побочных преципитинов в ответ на введение среды.

Нормальной сывороткой человека в дозе 0,5 мл были иммунизированы внутривенно 37 кроликов породы шиншилла весом в среднем 2,3 кг. Иммунизация была троекратной с трехдневными промежутками. Из этого числа 18 (опытная группа) кроликам 4 раза вводили в мозг гидролизат белка в объеме 0,5 мл: первый раз — за 2 дня до начала иммунизации, в дальнейшем — на следующий день после каждого введения антигена. Через 3—4 месяца все кролики были внутривенно реиммунизированы 1 мл нормальной сыворотки человека. Кроликам опытной группы на следующий день вводили в мозг 0,5 мл среды.

Пробы сывороток в реакции кольцепреципитации проводили на 5—6-й и 8—9-й день после последнего введения антигена. Антиген разводили в 100, 500, 1000, 3000, 5000, 7000, 10 000 и 15 000 раз. Наблюдение за реакцией вели в течение 30 минут.

Результаты определения титров приведены в табл. 1 и 2, из которых видно, что при второй пробе после реиммунизации, когда титры стали наиболее высокими, величина средней арифметической титров в опытной группе оказалась в 2 раза больше, чем в контрольной. Математический анализ экспериментальных данных по формуле достоверности и методу Стъюдента показал высокую степень достоверности различия средних. Девять кроликов опытной и 4 кролика контрольной группы с титром к 6-й минуте 1 : 10 000 были подвергнуты кровопусканию; из их сывороток были удалены неспецифические преципитины.

Таблица 2

Титры преципитинов в сыворотках кроликов контрольной группы

№ п/п Иммунизация Повторная иммунизация
титры преципитинов при пробе на
6-й день 8—9-й день 5-й день 8—9-й день

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

Среднее арифметическое титров

1 : 1 000

1 : 10 000

1 : 5 000

1 : 7 000

1 : 100

1 : 100

1 : 100

1 : 3 000

1 : 1 000

1 : 500

1 : 7 000

1 : 1 000

1 : 1 000

1 : 3 000

1 : 500

1 : 100

1 : 5 000

1 : 100

1 : 3 000

2 500

1 : 3 000

1 : 7 000

1 : 5 000

1 : 5 000

1 : 1 000

1 :500

1 : 100

1 : 7 000

1 : 10 000

1 : 100

1 : 10 000

1 : 1 000

1 : 100

1 : 5 000

1 : 3 000

1 : 100

1 : 5 000

1 :500

1 : 3 000

3 500

1 : 1 000

Пал

Пал

1 : 1 000

1 : 3 000

1 : 1 000

1 : 1 000

1 : 15 000

1 : 15 000

1 : 500

Пал

1 : I 000

1 : 1 000

1 : 10 000

1 : 1 000

1 : 1 000

1 : 15 000

1 : 100

1 : 3 000

4 300

1 : 10 000

 

 

1 : 15 000

1 : 15 000

1 : 3 000

1 : 1 000

1 : 15 000

1 : 15 000

1 : 1 000

 

1 : 500

1 : 1 000

1 : 15 000

1 : 3 000

1 : 1 000

1 : 15 000

1 : 100

1 : 5 000

7 100

Результаты опытов открывают перспективы искусственного повышения иммунизаторной реактивности путем интенсивных неспецифических воздействий на организм и позволяют присоединиться к мнению А. Д. Адо о механизме влияния внутримозговой иммунизации. А. Д. Адо указал на неспецифическое раздражение вегетативных центров обмена при внутримозговой иммунизации. Изменения функционального состояния этих центров вызывают изменения в деятельности ретикуло-зндотелиальной системы, что находит свое выраежние в повышенной интенсивности ности образования антител.

Выводы

  1. 1. При первичной и повторной внутривенной иммунизации кроликов нормальной сывороткой человека внутримозговое введение гидролизата белка вызывает более интенсивное образование преципитинов.
  2. 2. Внутримозговое введение гидролизата белка стимулирует преципитинообразование у кроликов с разными уровнями иммунизаторной реактивности.
  3. 3. Метод внутримозгового введения гидролизата белка может использоваться для получения преципитирующих белок сывороток высокого титра.
  4. 4. Сравнивая возможности внутримозгового метода иммунизации с внутримозговым методом стимуляции иммунизированных кроликов, следует отдать предпочтение второму методу. При его применении не ограничен объем вводимого внутривенно антигена, что позволяет применять оптимальные его дозы.

похожие статьи

Определение групповой принадлежности изолированных клеток влагалищного эпителия / Локтева Р.В., Локтев А.И., Шишкина Ж.А., Курзин Л.М. // Избранные вопросы судебно-медицинской экспертизы. — Хабаровск, 2022. — №21. — С. 78-82.

Использование методики окрашивания препаратов раствором акридинового оранжевого при определении групповой принадлежности изолированных клеток с помощью реакции смешанной агглютинации / Локтева Р.В., Королева М.В., Панасенко С.В., Курзин Л.М. // Избранные вопросы судебно-медицинской экспертизы. — Хабаровск, 2022. — №21. — С. 73-78.

Метод избирательной абсорбции при определении кровяных групп в кровяных пятнах / Серебряников П. // Судебно-медицинская экспертиза. — М.: Изд-во Наркомздрава, 1928. — №8. — С. 3-7.

Судебно-медицинские экспертизы и исследования вещественных доказательств биологического происхождения в России (по материалам 2003—2017 гг.) / Ковалев А.В., Куприна Т.А., Самоходская О.В., Кондратова И.В. // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 2018. — №6. — С. 29-32.

Обнаружение эклипсных антигенов в трупной крови / Локтева Р.В. // Избранные вопросы судебно-медицинской экспертизы. — Хабаровск, 2019. — №18. — С. 127-131.

больше материалов в каталогах

Судебно-биологические исследования