Влияние внутримозгового введения гидролизата белка на образование преципитинов у внутривенно иммунизированных кроликов
/ Потапов М.И. // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 1958 — №2. — С. 19-21.
Научно-исследовательский институт судебной медицины (дир. — проф. В. И. Прозоровский) Министерства здравоохранения СССР, Москва
Поступила в редакцию 9/Ш 1958 г.
Известно, что к преципитирующим сывороткам, применяемым в реакции Чистовича-Уленгута, предъявляются весьма высокие требования, которым отвечают сыворотки лишь части иммунизированных кроликов (по данным В.Я . Карякина, в 1/
случаев, по материалам П. Н. Косякова и М.Н . Резниковой, в 42,6%). В связи с этим возникает настоятельная потребность увеличить количество кроликов — продуцентов пригодной сыворотки. Нами проведены опыты неспецифической стимуляции процесса преципитинообразования. Предпосылкой послужили данные Г. X. Гильмановой об усиленной выработке столбнячного антитоксина у подкожно иммунизированных кроликов, которым в головной мозг вводился продукт гидролиза белка — питательная среда Глузмана, применяемая для получения столбнячного токсина.
Таблиц а 1
Титры преципитинов в сыворотках кроликов опытной группы
| № п/п | Иммунизация | Повторная иммунизация | ||
| титры преципитинов при пробе на | ||||
| 6-й день | 8—9-й день | 5-й день | 8—9-й день | |
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 Среднее арифметическое титров |
1 : 7 000 1: 10 000 1 : 10000 1 : 10000 1 : 5 000 1: 10 000 1 : 1 000 1 : 100 1 : 3 000 1:15 000 1 : 7 000 1 : 3 000 1 : 5 000 1 : 7 000 1:15 000 1 : 10000 1 : 7 000 1:500 . 7 000 |
1 : 5 000 1 : 15 000 1 : 7 000 1 : 10 000 1 : 5 000 1 : 15 000 1: 10 000 1 : 5 000 1 : 10 000 1 : 15 000 1 : 10 000 1 : 7 000 1 : 3 000 1: 15 000 1 : 15 000 1: 10 000 1 : 5 000 1 : 3 000 9 000 |
1 : 3 000 1 : 15 000 1 :500 1:15 000 1: 10 000 1 : 15 000 1 : 15 000 Пал 1 : 10 000 1 : 15 000 1 : 3 000 1:10 000 Пал 1 : 15 000 Пал 1 : 15 000 1 : 15 000 1 : 5 000 10 600 |
1 : 15 000 1 : 15 000 1 : 15 000 1 : 15 000 1 : 15 000 1 : 15 000 1 : 15 000
1 : 15 000 1:15 000 1 :300 0 1 :15000
1 :15 000
1 :15 000 1 :15 000 1 :15 000 14 200 |
Все опыты были проведены с одной партией среды Глузмана, полученной из Научно-исследовательского института вакцин и сывороток имени И. И. Мечникова, которая содержала 98 мг% аминного азота и 1,5% пептона; ее рН 7,2. По методу Робертс-Стольникова удалось уста
новить, что в среде, приготовленной из говяжьего мяса,, содержалось
0,0198% белка, т. е. в 350 раз меньше* чем в нормальной бычьей сыворотке. Видовая принадлежность этого белка при помощи соответствующих преципитирующих белох сывороток не могла быть установлена, что исключало возможность образования в организме кролика побочных преципитинов в ответ на введение среды.
Нормальной сывороткой человека в дозе 0,5 мл были иммунизированы внутривенно 37 кроликов породы шиншилла весом в среднем 2,3 кг. Иммунизация была троекратной с трехдневными промежутками. Из этого числа 18 (опытная группа) кроликам 4 раза вводили в мозг гидролизат белка в объеме 0,5 мл: первый раз — за 2 дня до начала иммунизации, в дальнейшем — на следующий день после каждого введения антигена. Через 3—4 месяца все кролики были внутривенно реиммунизированы 1 мл нормальной сыворотки человека. Кроликам опытной группы на следующий день вводили в мозг 0,5 мл среды.
Пробы сывороток в реакции кольцепреципитации проводили на 5—6-й и 8—9-й день после последнего введения антигена. Антиген разводили в 100, 500, 1000, 3000, 5000, 7000, 10 000 и 15 000 раз. Наблюдение за реакцией вели в течение 30 минут.
Результаты определения титров приведены в табл. 1 и 2, из которых видно, что при второй пробе после реиммунизации, когда титры стали наиболее высокими, величина средней арифметической титров в опытной группе оказалась в 2 раза больше, чем в контрольной. Математический анализ экспериментальных данных по формуле достоверности и методу Стъюдента показал высокую степень достоверности различия средних. Девять кроликов опытной и 4 кролика контрольной группы с титром к 6-й минуте 1 : 10 000 были подвергнуты кровопусканию; из их сывороток были удалены неспецифические преципитины.
Таблица 2
Титры преципитинов в сыворотках кроликов контрольной группы
| № п/п | Иммунизация | Повторная иммунизация | ||
| титры преципитинов при пробе на | ||||
| 6-й день | 8—9-й день | 5-й день | 8—9-й день | |
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 Среднее арифметическое титров |
1 : 1 000 1 : 10 000 1 : 5 000 1 : 7 000 1 : 100 1 : 100 1 : 100 1 : 3 000 1 : 1 000 1 : 500 1 : 7 000 1 : 1 000 1 : 1 000 1 : 3 000 1 : 500 1 : 100 1 : 5 000 1 : 100 1 : 3 000 2 500 |
1 : 3 000 1 : 7 000 1 : 5 000 1 : 5 000 1 : 1 000 1 :500 1 : 100 1 : 7 000 1 : 10 000 1 : 100 1 : 10 000 1 : 1 000 1 : 100 1 : 5 000 1 : 3 000 1 : 100 1 : 5 000 1 :500 1 : 3 000 3 500 |
1 : 1 000 Пал Пал 1 : 1 000 1 : 3 000 1 : 1 000 1 : 1 000 1 : 15 000 1 : 15 000 1 : 500 Пал 1 : I 000 1 : 1 000 1 : 10 000 1 : 1 000 1 : 1 000 1 : 15 000 1 : 100 1 : 3 000 4 300 |
1 : 10 000
1 : 15 000 1 : 15 000 1 : 3 000 1 : 1 000 1 : 15 000 1 : 15 000 1 : 1 000
1 : 500 1 : 1 000 1 : 15 000 1 : 3 000 1 : 1 000 1 : 15 000 1 : 100 1 : 5 000 7 100 |
Результаты опытов открывают перспективы искусственного повышения иммунизаторной реактивности путем интенсивных неспецифических воздействий на организм и позволяют присоединиться к мнению А. Д. Адо о механизме влияния внутримозговой иммунизации. А. Д. Адо указал на неспецифическое раздражение вегетативных центров обмена при внутримозговой иммунизации. Изменения функционального состояния этих центров вызывают изменения в деятельности ретикуло-зндотелиальной системы, что находит свое выраежние в повышенной интенсивности ности образования антител.
Выводы
- 1. При первичной и повторной внутривенной иммунизации кроликов нормальной сывороткой человека внутримозговое введение гидролизата белка вызывает более интенсивное образование преципитинов.
- 2. Внутримозговое введение гидролизата белка стимулирует преципитинообразование у кроликов с разными уровнями иммунизаторной реактивности.
- 3. Метод внутримозгового введения гидролизата белка может использоваться для получения преципитирующих белок сывороток высокого титра.
- 4. Сравнивая возможности внутримозгового метода иммунизации с внутримозговым методом стимуляции иммунизированных кроликов, следует отдать предпочтение второму методу. При его применении не ограничен объем вводимого внутривенно антигена, что позволяет применять оптимальные его дозы.
похожие статьи
Обнаружение эклипсных антигенов в трупной крови / Локтева Р.В. // Избранные вопросы судебно-медицинской экспертизы. — Хабаровск, 2019. — №18. — С. 127-131.