Обнаружение и определение анилина при судебно-химических исследованиях

/ Грязнова Е.А. Беликов В.Г.  // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 1959 — №4. — С. 39-43.

Грязнова Е.А., Беликов В.Г. Обнаружение и определение анилина при судебно-химических исследованиях

Кафедры судебной химии (зав.—доц . Е. А. Грязнова) и фармацевтической химии (зав. — доц. В. Н. Бернштейн) Пятигорского фармацевтического института

Поступила в редакцию I6/III 1959 г.

 

 

 

 

ссылка на эту страницу

В руководстве по судебной химии А. В. Степанова для обнаружения анилина в биологическом материале рекомендуются лигниновая проба, цветные реакции с хлорной известью и бихроматом калия, а также осадочные реакции с бромной водой и формальдегидом. Лигниновая проба и реакция осаждения анилина формальдегидом мало чувствительны.

Одним из авторов этой статьи [2] предложена новая цветная реакция на анилин с раствором нитропруссида «атрия, подвергшимся ультрафиолетовому облучению. Эта реакция была проверена на кафедре судебной химии Пятигорского фармацевтического института Для обнаружения анилина в биологическом материале. Испытания дали положительные результаты. Ввиду высокой чувствительности реакции отчетливые результаты получены даже в тех случаях, когда реакции по Степанову были отрицательными. На основании этого нами подробно изучены возможности использования указанной реакции для обнаружения и определения анилина в биологическом материале.

Экспериментальная часть

1. Обнаружение анилина

Работу проводили с дважды перегнанным при 184—185° анилином. Рабочими растворами служили свежеприготовленные водные растворы анилина различной концентрации в зависимости от проводимого исследования.

Для приготовления реактива 100 мл свежеприготовленного водного 1% раствора нитропруссида натрия помещали в склянку из белого стекла диаметром 5—6 см и облучали светом кварцевой лампы в течение 20 минут. Расстояние между центрами склянки и кварцевой лампы должно быть не более 10 см. Аналогичные качества то же количество реактива приобретает при облучении прямыми солнечными лучами в течение 6—15 минут (в зависимости от времени года). Приготовленный в оптимальных условиях реактив должен иметь светло-коричневое окрашивание.

Анилин, изолированный из биологического объекта перегонкой с водяным паром, хорошо обнаруживается реакцией с облученным раствором нитропруссида натрия в полученном дистилляте. Методика реакции сводится к прибавлению к 1 мл дистиллята нескольких капель 2°/о раствора карбоната натрия (до щелочной реакции на лакмус) и 1 мл приготовленного описанным выше способом 1% раствора нитропруссида натрия. В присутствии анилина в количестве более 50 у в- 1 мл через несколько секунд появляется синее окрашивание.

С помощью этой реакции можно обнаружить 20 у анилина в 1 мл дистиллята. При такой концентрации анилина окраска наступает через 5—10 минут. При меньшей концентрации анилина в дистилляте окраска может также появиться, но через больший промежуток времени.

Нас заинтересовал вопрос, не мешают ли обнаружению анилина другие вещества, летучие с водяным паром. Мы провели перегонку, изолируя анилин из биологического материала, в присутствии синильной кислоты, хлороформа, хлоралгидрата, гексахлорана, фенола, метилового, этилового и изоамилового спиртов, нитробензола, бензола, толуола, формальдегида, Установлено, что ни одно из перечисленных веществ обнаружению анилина не мешает, даже если их вносить в десятикратном количестве по отношению к анилину.

2 . Определение анилина в биологическом материале

Для количественного определения анилина наиболее часто используются общеизвестный броматометрический метод и метод диазотирования и образования азокраски. Описаны также различные модификации колориметрического определения анилина по образованию индофенола и объемный метод, основанный на взаимодействии анилина с роданидом аммония в присутствии сульфата меди.

В литературе мы не встретили описания методов определения анилина в биологическом материале. При использовании для этой цели всех указанных методов, за исключением броматометрического, мы получили завышенные результаты. В частности, пои определении роданидным методом находили более 200% и даже 300% анилина. Количественное определение по образованию азокраски и индофенола до конца «е проводили, так как получаемая окраска тотчас же была значительно интенсивнее, чем в стандартном растворе. Получение завышенных результатов объясняется, очевидно, тем, что при разложении биологического материала образуются аминопроизводные, которые, подобно .анилину, взаимодействуют с указанными выше реактивами.

Броматометрическое определение анилина в биологическом материале дало вполне удовлетворительные результаты (табл. 1).

Таблица 1

Броматометрическое определение анилина

 

Количество объекта (в г)

Добавлено анилина (в г)

Количество дистиллята (в мл)

Содержание анилина г

%

1

2

3

4

5

6

100,0

100,0

100,0

100,0

100,0

100,0

0,05

0,05

0,05

0,03

0,03

0,03

190

245

195

225

260

235

0,0413

0,043

0,039

0,0256

0,0229

0,0233

82,6

86,0

78,0

85,3

76,3

79,3

Как видно из табл. 1, количество анилина, определяемое броматометрически, колеблется в пределах 76—86%.

Поскольку ни один из широко известных колориметрических методов определения анилина неприменим для анализа дистиллята из трупного материала, мы проверили возможность количественного определения анилина по реакции с нитропруссидом натрия.

Прежде всего было установлено количество дистиллята, которое необходимо собрать при различных дозах внесенного в объект анилина,, чтобы иметь возможность проводить количественное определение. Для этого в 100 г трупного материала (печень, легкое) вносили различные количества Гй/о раствора анилина. В процессе перегонки через каждые 25 мл с дистиллятом проводили испытание на присутствие анилина по реакции с нитропруссидом натрия. О результате реакции судили через 15—20 минут.

Повторными перегонками установлено, что при наличии в объекте 0,1 г анилина необходимо собрать до 400 мл дистиллята, при 0,01 г — 150 мл и при 0,001 г — не менее 75 мл.

Затем мы установили оптимальное время наступления постоянной окраски и влияние разбавления на получение максимальной окраски. Оказалось, что после добавления реактивов — 2% раствора карбоната натрия я облученного раствора нитропруссида натрия — устойчивое окрашивание наступает через 20 минут. Более длительное стояние дает мало заметные изменения. Если для колориметрирования необходимо увеличить количество жидкости путем разбавления, то воду нужно вливать через 20 минут после добавления реактива, т. е. после наступления максимальной окраски реакционной смеси. В процессе работы мы установили, что гораздо удобнее увеличивать количества реактивов (растворов карбоната натрия и нитропруссида натрия), чем разбавлять водой.

Был приготовлен стандартный 1% водный раствор анилина, из которого по мере надобности готовили шкалу € содержанием анилина 100, 150, 200, 250 л 300 у.

Методика количественного определения сводилась к следующему: в 100 г трупного материала вносили определенное количество анилина и после 2—3 часового стояния перегоняли до отрицательной реакции с нитропруссидом натрия в течение 20 минут. Затем .измеряли количество полученного дистиллята. К 19 мл перегона прибавляли 3 мл 2°/о раствора карбоната натрия и 7 мл реактива. Одновременно ставили аналогичную реакцию с 10 мл стандартных растворов нескольких концентраций, содержащих в 1 мл приблизительно такое же количество анилина, какое может быть (теоретически) в 1 мл перегона. Через 20 минут колориметрировали на колориметре Дюбоска.

Проведено 9 перегонок, из каждого перегона сделано не менее трех определений (табл. 2) .

Таблица 2

Количественное определение анилина

№ опыта

Количе ство объекта (в г)

Добавле но анилина

(в г)

Количе ство дистиллята (в мл)

Теоретическая концен трация
( в у/мл)

Концен траци я стандартного раствора (в у/мл)

Обнаружено анилина

в 1 мл

(в у)

всего

(в г)

%

1

2

3

4

5

6

7

8

9

100

100

100

100

100

100

100

100

100

0,05

0,05

0,05

0,1

0,1

0,1

0,03

0,03

0,03

190

245

195

370

420

350

225

260

235

263

204

256

270

238

285,8

133,3

115,3

127,3

200

200

200

200

200

200

100

100

100

210

191

200

213,3

203

210,5

105,6

97,6

100,5

0,04

0,0468

0,039

0,0789

0,085

0,073

0,024

0,0255

0,0236

80,0

93,5

78,0

78,9

85,26

73,5

80,0

85,0

78,6

Предлагаемый метод позволяет обнаруживать 73,5—93,5% анилина в биологическом объекте и по чувствительности не уступает общепризнанному броматометрическому методу, а по технике и продолжительности имеет преимущества.

Другие летучие амины данной реакции не мешают.

Полученные результаты проверены на внутренних органах отравленного кролика (табл. 3). Кролику весом 2,5 кг ввели через зонд в желудок 5 г анилина. Смерть наступила через 15 часов. Через 30 часов после смерти животное вскрыли,. Отмечено полное расслабление всей гладкой мускулатуры, застойная гиперемия. Коронарные сосуды сердца резко расширены, на верхней части левого желудочка заметны белые пятна диаметром 2—3 мм. Печень внешне oe j видимых изменений, но ткань на разрезе дряблая, дает большой соскоб. Такая же картина наблюдалась в селезенке. На задней внутренней поверхности желудка — фиолетово-бурое пятно, занимающее половину желудка. В содержимом желудка много слизи. Кишечник вздут, гиперемирован.

Таблица 3

Количество анилина, обнаруженное во внутренних органах кролика

 

На анализ взяли желудок с содержимым, кишечник, печень, почки, сердце, легкие и мышцы. Провели перегонку с водяным паром, измерили полученные дистилляты и с определенным количеством перегонов провели количественное определение анилина приведенной выше методикой.

Выводы
  1. Установлена возможность обнаружения анилина в биологическом материале по реакции с облученным ультрафиолетовыми лучами раствором нитропруссида натрия. Реакция специфична и обладает высокой чувствительностью (20у в 1 мл).
  2. Предложен колориметрический метод определения анилина в трупном материале, с помощью которого может быть найдено 73,5—93,5% анилина. В отличие от других колориметрических методов предлагаемый метод специфичен, прост, удобен в выполнении и не дает завышенных результатов.
  3. Предлагаемая качественная реакция и метод количественного определения проверены на внутренних органах экспериментально затравленного кролика. Анилин найден в желудке (34%), кишечнике (8°/о), печени (1,18%) и мышцах (следы). В легких, почках и сердце его не обнаружено.

похожие материалы в каталогах

Судебно-химические исследования

похожие статьи

К вопросу об анализе фосфорорганических пестицидов методом ТСХ / Горбачева Н.А. // Матер. IV Всеросс. съезда судебных медиков: тезисы докладов. — Владимир, 1996. — №2. — С. 145-146.

Проблемные аспекты химикотоксикологического исследования психоактивных веществ / Клименко Т.В., Клевно В.А., Максимов А.В. // Судебная медицина. — 2018. — №4. — С. 36-40.

Установление наличия кала в следах на вещественных доказательствах методом восходящей тонкослойной хроматографии / Четвертнова А.П., Федоровцев А.Л., Эделев Н.С. // Судебная медицина. — 2018. — №4. — С. 30-32.

Влияние давности и температуры хранения трупной крови на показатели веществ низкой и средней молекулярной массы (ВНСММ) / Эделев И.С. // Вестник судебной медицины. — Новосибирск, 2018. — №3. — С. 15-18.

Спектрофотометрическое исследование мекония и кала в следах на вещественных доказательствах / Четвертнова А.П., Федоровцев А.Л., Эделев Н.С. // Вестник судебной медицины. — Новосибирск, 2018. — №3. — С. 36-38.