Определение групп Нр и Gc жидкой крови посредством вертикального электрофореза в одном блоке полиакриламидного геля

/ Старостин Н.Н. Кюрчевский В.В.  // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 1978 — №3. — С. 30-31.

Старостин Н.Н., Кюрчевский В.В. Определение групп Нр и Gc жидкой крови посредством вертикального электрофореза в одном блоке полиакриламидного геля

Кафедра судебной медицины (зав.— проф. П.Г. Арешев) Крымского медицинского института, Крымское областное бюро судебно-медицинской экспертизы (нач. Н.Н. Старостин), Симферополь

УДК 340.624.412:543.545.4

Определение групп Нр и Gc жидкой крови посредством вертикального электрофореза в одном блоке полиакриламидного геля. Старостин Н.Н., Кюрчевский В.В. Суд.-мед. эксперт., 1978, № 3, с. 30-31.

Предложенная модификация вертикального электрофореза в полиакриламидном геле позволяет в одном блоке устанавливать не только разновидности гаптоглобина, но и группоспецифического компонента. Показана возможная эффективность использования этих разновидностей при экспертизе спорного отцовства.

Иллюстрация 1.

 

HP- AND GC-GROUPING OF LIQUID BLOOD BY VERTICAL ELECTROPHORESIS IN A SINGLE BLOCK OF POLYACRYLAMIDIC GEL

N. N. Starostin, V. V. Kiurchevski

A reliable time-saving technique is suggested. The proceeding is adapted for cases of disputed paternity. The method was successfully tested on 750 persons of Crimean population.

ссылка на эту страницу

Метод вертикального электрофореза в полиакриламидном геле позволяет устанавливать сывороточные группы Нр и Gc в жидкой крови человека (Н.Н. Старостин, 1974, 1975). Krupe (1969) и др. указали на возможность одновременного определения этих двух систем в одном блоке из полиакриламида.

Мы исследовали сыворотки крови доноров обоего пола русской и украинской национальности. Использовали ранее опубликованную методику— модификацию вертикального электрофореза в полиакриламидном геле для определения группоспецифического компонента (Gc) с аналогичным насыщением сыворотки раствором гемоглобина и применением аппаратуры.

Применяя 4% полиакриламидный гель в непосредственной близости от старта, обнаруживали, как правило (но не всегда), две фракции 9 и 6 (здесь и далее цифровые обозначения условны) , обладающие постоянной скоростью передвижения (см. рисунок), что устанавливается при контрольной окраске белков раствором бензидина. Фракция 6 может совпадать с одной из фракций Нр 2—1 или 2—2, это приводит к известному увеличению их интенсивности. При окраске амидо черным в зоне разделения белков с Нр 1—1 устанавливали две непостоянные и слабо проявляющиеся фракции 3 и За и наиболее мощную и быстро мигрирующую фракцию 1. Спектр белков Нр 2—2 характеризуется комплексом наиболее медленно передвигающихся фракций. Нр 2—1 свойственна группа фракций, обладающих наибольшей скоростью миграции,, из них одна, наиболее близко расположенная к аноду, так же, как и аналогичная фракция в Нр 1—1, совпадает с фракцией трансферрина (Тf). Совпадение фракций Нр 1 — 1 и Нр 2—1 с Tf может не наблюдаться при известном увеличении длины электрофоретического разделения, при этом из зоны гаптоглобина выделяется фракция Tf, имеющая несколько большую и непостоянную скорость передвижения. Что касается резкого увеличения интенсивности основной фракции 1 в Нр 1 — 1, то это может происходить не только за счет слияния ее с фракцией Tf, но и вследствие наибольшего уровня белка, присущего данной разновидности группы гаптоглобина.

В зоне, непосредственно примыкающей к альбумину со стороны катода, обнаруживали также три наиболее распространенных белковых спектра, относящихся к компоненту Gc. Различают Gc 2—2, Gc 2—1, Gcl—1 (см. рисунок). Для Gc 2—2 характерна одна наиболее мощная и медленно мигрирующая фракция II; для Gc 1 — 1 — наиболее быстро передвигающаяся фракция III. Группе Gc 2—1 свойственны фракции II и III, совпадающие с уровнем миграции фракций II (Gc 2—2) и III (Gc 1—1). Три разновидности группоспецифического компонента могут иметь более быстро мигрирующие, но не постоянно встречающиеся фракции: Ila, IlIa, IV и IVa, интенсивность которых менее выражена.

Провели 750 исследований образцов сывороток крови от доноров. Группы Нр и Gc определяли не позже 1—2 дней после взятия крови, сыворотку хранили в холодильнике.

Фенотип Gc 1—1 определили у 340 (46,6%), Gc 2—1—у 325 (42,1%), Gc 2—2 — у 85 доноров (11,3%) против ожидаемых соответственно 336, 9, 331,2, 81,9.

Фенотип Нр 1—1 обнаружили у 116 (14,9%), Нр 2—1—у 367 (49,4%)) и Нр 2—2 — у 267 (35,7%) доноров против ожидаемых соответственно 119,6, 359,7, 270,7.

Принимая во внимание генетическую модель наследования Gc 1, Gc 2, а также Нр 1 и Нр 2, определили частоты аллелей для разновидностей группоспецифического компонента: Gc1 = 0,6765, Gc2 = 0,3235 при X2 =1,137, Р<0,80, но Р>0,70; для разновидностей гаптоглобина: Нр1 = 0,3960, при Нр2 = 0,6040, при Х2 = 0,6460 и Р>0,90, но Р>0,80.

Эффективность судебно-биологических экспертиз спорного отцовства для населения Крыма составила по системе Gc 16,65%, по Нр — 18,55% (при одномоментном определении 35,2%).

Выводы

  1. Предложенная модификация метода вертикального электрофореза в полиакриламидном геле позволяет одновременно определять в одном блоке разновидности не только гаптоглобина, но и группоспецифического компонента.
  2. Получены достоверные результаты распределения групп Нр и Gc среди части населения Крымской области, показана возможная эффективность использования этих сывороточных систем при производстве судебно-биологических экспертиз спорного отцовства.
  3. Одновременное определение в одном блоке разновидностей Нр и Gc крови человека значительно сокращает время, затрачиваемое на исследование.

похожие материалы в каталогах

Судебно-биологические исследования

похожие статьи

К вопросу об использовании макроглобулинов крови человека при судебно-медицинском исследовании трупа / Яковлев Д.Ю. // Вестник судебной медицины. — Новосибирск, 2018. — №4. — С. 16-18.

К анализу и интерпретации результатов при установлении видовой принадлежности биологических объектов (случай из практики) / Кулясова Н.А., Недолуга Н.О. // Избранные вопросы судебно-медицинской экспертизы. — Хабаровск, 2018. — №17. — С. 143-145.

Дифференциация в смешанных пятнах антигена А выделений от антигена А крови при помощи лектина / Потапов М.И. // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 1968. — №3. — С. 21-26.

Сравнительное исследование антигенов системы АВ0 в слюне, сперме и в секрете влагалища / Масис Т.М. // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 1968. — №2. — С. 21-27.

Выявление в сыворотках крови людей антител к антигенам системы Gm / Резникова М.Н., Баринова Л.И., Соловьева Н.А., Башлай А.Г., Моргулис Н.Б. // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 1968. — №1. — С. 35-38.