О внедрении системы HLA в судебно-медицинскую практику

/ Васильев М.А. Кривда Г.Ф. Игнатов Р.К.  // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 1977 — №3. — С. 31-32.

Васильев М.А., Кривда Г.Ф., Игнатов Р.К. О внедрении системы HLA в судебно-медицинскую практику

Одесское областное бюро судебно-медицинской экспертизы (нач. — проф. М.А. Васильев)

УДК 340.624.4:612.118.221.2-08

О внедрении системы HLA в судебно-медицинскую практику. Васильев М.А., Кривда Г.Ф., Игнатов Р.К. Суд.-мед. эксперт., 1977, № 3, с. 31-32.

Изучив распределение HLA у украинцев Одессы и Одесской области, можно отметить, что наиболее частыми антигенами системы HLA являются:    по локусу I —

HLA—А2, w25, 1 и 3, по локусу II — HLA—В 7, w35 и 12. Наиболее частым и устойчивым гаплотипом — А 2, В 12. Результаты 37 экспертиз по вопросам спорного отцовства с применением системы HLA подтверждают, что система HLA вполне пригодна для такого рода исследований, делает ее более эффективной, повышает вероятность выявления ложно указанных отцовств.

Кроме того, система HLA может быть применена в судебно-медицинских экспертизах по случаям детоубийства и для установления неизвестных лиц.

 

THE HLA-SYSTEM IN MEDICO-LEGAL PRACTICE

M. A. Vasilyev, G. F. Krivda, R. K. Ignatov

The frequency of the HLA-System was studied in the Ukrainian population. The system was successfully applied in 37 cases of disputed paternity.

ссылка на эту страницу

Заключения по поводу спорного отцовства, материнства и замены детей являются групповыми, а не индивидуальными. В результате удается лишь относительно редко исключать предполагаемого отца и никогда нельзя утверждать отцовство (материнство) конкретного лица. Процент исключения ложно указанных отцовств целиком зависит от частоты распределения антигенов и числа исследуемых экспертом систем. Система лейкоцитарных антигенов (HLA) является сложной, полиморфной, она весьма перспективна для использования в судебно-медицинских целях, однако соответствующих сообщений мы не нашли.

В 1968 г. ВОЗ официально приняла комбинацию антигенов HLA как самостоятельную систему. С тех пор количество известных антигенов увеличивалось и на 1975 г. составляло 51. Антиген обозначается HLA с добавлением букв А, В, С и D в зависимости от локусов.

В настоящее время установлено, что субстрат системы HLA заложен в VI паре гомологичной аутосомной хромосомы. В каждом локусе находится комплекс генов, контролирующих обособленные Антигены. В одной хромосоме представлено по одной специфичности из каждого локуса, а в соответствующей хромосомной паре — по две. Таким образом, каждый человек получает от родителей по одному аллелю от каждого локуса, т. е. по одному гаплотипу, идентичному материнскому и отцовскому. Ранее было известно два локуса «La», или I (сейчас он носит название «А»), и «Four», или II (сейчас его называют «В»), Обнаружены еще два локуса: III — «С» и IV — «D» (Dausset, 1970; Walford, 1969).

Установлено, что антигены HLA обнаруживаются практически во всех тканях и органах и располагаются неравномерно на поверхности мембран ядросодержащих клеток, больше всего их содержится в лейкоцитах, тромбоцитах, селезенке, легких, печени и др. (Kourilsky и соавт., 1967; Berah и соавт., 1970). Большинство исследователей отмечают отсутствие связи ее с другими изосерологическими и сывороточными системами. По биохимической структуре HLA-гликопротеид с молекулярным весом до 60 000 (Sanderson и соавт., 1971). Антигены системы HLA формируются в эмбриональном периоде и хорошо уже определяются с 3—5-месячного возраста плода (Seiger и соавт., 1969; Pellegrino и соавт., 1970). В основе метода определения HLA лежит реакция между лейкоцитами или тромбоцитами и иммунными сыворотками анти-HLA.

Разработаны 3 основные методики: реакция лейкоагглютинации, лимфоцитотоксическая и реакция связывания комплемента, которые можно использовать в микро- и макромодификациях. Мы пользуемся микро-лимфоцитотоксической реакцией Тарасаки в модификации Dausset. Преимуществами этого метода являются высокая воспроизводимость результатов и экономное расходование сывороток. На одно титрование расходуется 0,001 мл сыворотки, таким образом, расходуя 1 мл ее, можно протипировать до 1000 человек. Набором иммунных сывороток анти-HLA (по 1 мл каждой) можно провести свыше 300 экспертиз спорного отцовства. Эта методика требует также относительно малого количества крови, из которой выделяются лимфоциты. Так, у взрослых достаточно взять 5—6 мл, а у детей — всего 1—3 мл.

Отступя от классической методики получения лимфоцитов, мы не дефибринировали кровь детей, а помещали ее в раствор гепарина со средой № 199 в соотношении 1:10. Использовали набор иммунных сывороток анти-HLA, изготовленных и проверенных в отношении титра и специфичности в лаборатории Минеева (Болгария). Этот набор выявлял 26 антигенов. Из антигенов HLA, относящихся к локусу I мы определяли: HLA — A 1, 2, 3, 9, 11, 28, 29, 23, 24, 25, 32 и к локусу II — HLA — В 5, 7. 8, 12. 13, 14. 18. 27, ω15, ω16, ω17, ω21. ω22. ω35, ω40 1

В целях изучения распределения HLA исследовали свыше 300 жителей Одессы и Одесской области украинской национальности обоего пола, преимущественно доноров станции переливания крови. Проведенный анализ показал: а) наиболее распространены антигены HLA— А2, ω25, 1, з и HLA —В7, ωз5, 12; б) наиболее распространен гаплотип А2, В2.

Наряду с общепризнанными методами в 37 экспертизах использовали и определение HLA. Выяснили, что там, где нет исключения отцовства,, ребенок унаследует антигены матери и отца по гаплотипам. Наблюдение 1. Мать —HLA —A I, II/HLA —В 8, ω17. Предполагаемый отец —HLA — Аω24,    ω25/HLA —В 5, ω16. Ребенок -HLA-A1 ω25/HLA-В 8, ω16. Ребенок от матери унаследовал гаплотип А18, а от предполагаемого отца —Аω25/Вω16. Наблюдение 2. Мать —HLA —А 2, 3/HLA —В 5, ш40. Предполагаемый отец— HLA — А2„гз/НЬА В 27, ω35. Ребенок —HLA — A2ω23/HLA —В5, ω35. От матери ребенок унаследовал HLA —A2/HLA — В 5, от отца — Аω23/Вω35.

Из 37 проведенных экспертиз в 34 случаях система HLA подтвердила предполагаемую возможность отцовства по системам ABO, MN, P1, Rh, Нр. В 2 экспертизах было обосновано исключение отцовства по системам AB0 и HLA и в 1 экспертизе — только по системе HLA.

Исследование серологических систем дало следующие результаты: истица — 0αβ,MN,P + ,Rh + ,Hp 2:1; ответчик — 0αβ,N,P—,Rh—,Нр 2:1; ребенок — Oαβ, MN,P—,Rh + ,Hp 2:1. Эти результаты не исключали ответчика в отношении ребенка, однако, применив исследование HLA, удалось категорически исключить его отцовство:истица—HLA—A 1,2/HLA — В 5, 17; ответчик — HLA — А2, W24/HLA — в 5, w35; ребенок— HLA — A13/HLA — Bw17, w18.

Это исследование показало, что ребенок не имеет антигенов, которые он мог бы унаследовать от ответчика, и последний не мог являться отцом ребенка.

Полученные результаты показали, что система HLA вполне пригодна для экспертиз спорного отцовства, материнства и замены детей. Кроме того, она в принципе может быть полезна не только по вышеуказанным делам, но и в случаях детоубийства, идентификации неизвестных трупов (если кровь можно взять в первые сутки после смерти и имеются предполагаемые близкие родственники), а также при розыске и установлении близких родственников конкретного человека.

 

1 ω — антигены, нуждающиеся в уточнении и дальнейшей проверке.

похожие материалы в каталогах

Судебно-биологические исследования

похожие статьи

К вопросу об использовании макроглобулинов крови человека при судебно-медицинском исследовании трупа / Яковлев Д.Ю. // Вестник судебной медицины. — Новосибирск, 2018. — №4. — С. 16-18.

К анализу и интерпретации результатов при установлении видовой принадлежности биологических объектов (случай из практики) / Кулясова Н.А., Недолуга Н.О. // Избранные вопросы судебно-медицинской экспертизы. — Хабаровск, 2018. — №17. — С. 143-145.

Дифференциация в смешанных пятнах антигена А выделений от антигена А крови при помощи лектина / Потапов М.И. // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 1968. — №3. — С. 21-26.

Сравнительное исследование антигенов системы АВ0 в слюне, сперме и в секрете влагалища / Масис Т.М. // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 1968. — №2. — С. 21-27.

Выявление в сыворотках крови людей антител к антигенам системы Gm / Резникова М.Н., Баринова Л.И., Соловьева Н.А., Башлай А.Г., Моргулис Н.Б. // Судебно-медицинская экспертиза. — М., 1968. — №1. — С. 35-38.