Разработка методики ферментативного гидролиза для изолирования токсичных веществ из образцов волос

doi: 10.17116/sudmed201760236-40

Асп. Ю.В. Слустовская, М.В. Крысько, к.х.н., доц. О.Ю. Стрелова

Кафедра фармацевтической химии (зав. — к.х.н., доц. О.Ю. Стрелова) Санкт-Петербургской государственной химико-фармацевтической академии, Санкт-Петербург, Россия, 197376

Цель исследования — разработка и валидация методики изолирования токсичных веществ из волос на примере производных барбитуровой кислоты с помощью ферментативного гидролиза. Эксперименты проводили с использованием лабораторных животных: белые крысы-самки и морские свинки-альбиносы, которые в течение 4 мес ежедневно перорально получали раствор фенобарбитала. Шерсть, собранную от подопытных животных, подвергали кислотному гидролизу раствором 6М хлористоводородной кислоты и ферментному гидролизу растворами химопсина, химотрипсина, трипсина и папаина. Анализ полученных извлечений проводили методом газовой хроматографии с масс-селективным детектированием. Разработанная методика ферментативного гидролиза показала лучшие результаты по сравнению с кислотным гидролизом. На основании полученных результатов была проведена сравнительная характеристика методик кислотного и ферментативного гидролизов. Разработанная методика была валидирована.

Ключевые слова: производные барбитуровой кислоты, фенобарбитал, волосы, ферментативный гидролиз, химопсин, химотрипсин, папаин, трипсин.

The development of the method for enzymatic hydrolysis for the extraction of toxic substances from the hair samples

YU.V. SLUSTOVSKAYA, M.V. KRYS’KO, O.YU. STRELOVA

Saint-Petersburg State Chemical and Pharmaceutical Academy, Saint-Petersburg, Russia, 197376

The objective of the present study was to develop and validate the method for the extraction of toxic substances from the hair samples as exemplified by enzymatic hydrolysis of barbituric acid derivatives. The experiments were carried out with the use of laboratory animals (white female rats and albino guinea pigs) that had been daily given a phenobarbital solution per os during 4 months preceding the study. The hairs obtained from the experimental animals were subjected to acid hydrolysis with a 6 mole hydrochloric acid and enzymatic hydrolysis with the use of chymopsin, trypsin, chymotrypsin, and papain solutions. The analysis of the extracted materials was performed by means of gas chromatography with mass-selective detection. The application of the proposed method for enzymatic hydrolysis produced the better results than acid hydrolysis. This technique was validated. The results of the study made possible the comparative characteristic of the effectiveness of acid and enzymatic hydrolysis.

Keywords: barbituric acid derivatives, phenobarbital, hair, enzymatic hydrolysis, chymopsin, trypsin, chymotrypsin, papain.

DOI: 10.17116/sudmed201760236-40