Выявление в сыворотках крови людей антител к антигенам системы Gm

Антитела к антигенам системы Gm в сыворотке крови людей встречаются чрезвычайно редко. Grubb и Laurel считают, что они могут быть обнаружены только у больных хроническим ревматическим полиартритом с положительной реакцией Ваалер — Розе.

Roger находил антитела анти-Gm в сыворотках больных хроническим полиартритом в 10% случаев. Частота обнаружения их зависит от контингента исследуемых.

Fuenfhausen с соавторами указывают, что антитела анти-Gm встречаются и у здоровых. Так, Fuenfhausen при исследовании сыворотки. 8000 здоровых у 5 из них обнаружил антитела анти-Gm. Ropartz, исследуя 16 000 сывороток тоже от клинически здоровых, у 9 нашел антитела анти-Gm.

В дальнейшем было установлено, что сыворотки анти-Gm, полученные от больных ревматизмом и здоровых, обладают различными серологическими свойствами (Prokop). Сыворотки типа Ragg получают от лиц с активным ревматическим процессом; они имеют более высокий титр, часто дают выраженную прозону и по происхождению являются иммунными. Сыворотки типа Snagg происходят от здоровых, редко дают прозону, имеют спонтанное происхождение и относятся к категории холодовых антител (Fuenfhausen, Prokop; Попвасильев).

Sander и Stichnoth находили антитела анти-Gm в 30% исследованных сывороток маленьких детей. В 1964 г. Sander сообщил об экспертизе спорного отцовства, когда ответчик и ребенок имели в сыворотке антитела анти-Gm. Автор не исключает наследственной передачи способности к образованию антител анти-Gm.

В литературе имеются указания на возможность получения сывороток анти-Gm иммунным путем. Так, Hess, Butler в 1962 г. получили сыворотки анти-Gm^a и aнти-Gm^b иммунизацией обезьян макака резус, Podliachouk и Eyquem — сыворотки анти-Gm^a, анти-Gm^b и анти-Gm^х иммунизацией коз, a Luczkiewiez-Mulcycowa — сыворотки анти-Gm^a иммунизацией кроликов.

В отечественной литературе мы нашли только одну работу К.К. Решетник, выявившей в сыворотке крови больной ревматическим полиартритом антитела анти-Gm^a.

Ограниченное использование сывороточных групп в Советском Союзе (А.К. Туманов, М.А. Умнова с соавторами) объясняется отсутствием отечественных сывороток анти-Gm.

В связи с этим целью настоящей работы были выявление антител к антигенам системы Gm в сыворотках крови людей, их идентификация и изучение распределения сывороточных групп среди населения Москвы.

Для сенсибилизации ORh+ эритроцитов изучили 24 сыворотки с неполными антителами анти-D и анти-CD. Пригодными оказались 3 сыворотки — одна для работы с сыворотками анти-Gm^a и анти-Gm^х, две другие только для анти-Gm^a. Такие сыворотки, по мнению Prokop и Uhlenbruck, можно получить от женщин, дети которых болели гемолитической желтухой, а также от доноров обоего пола, перенесших несовместимые гемотрансфузии.

Собственные исследования

К 0,3—0,4 мл сыворотки анти-D, разведенной в 2 раза физиологическим раствором, добавляли 0, 1 мл трижды отмытых эритроцитов группы ORh+, помещали в термостат (37°) на 1,5 часа, после чего эритроциты снова 3 раза отмывали физиологическим раствором и готовили 5% взвесь.

Испытуемые сыворотки разводили в 4 раза (во избежание зоны задержки), помещали по 3 капли в 2 агглютинационные пробирки. В одну пробирку добавляли 1 каплю 5% взвеси сенсибилизированных, в другую — 1 каплю несенсибилизированных эритроцитов группы ORh+ (для контроля). Пробирки тщательно встряхивали и помещали в рефрижератор (4—6°) на 1,5 часа. После встряхивания пробирок реакцию агглютинации наблюдали невооруженным глазом в проходящем свете.

Стойкая агглютинация в сыворотке с сенсибилизированными эритроцитами и отсутствие ее в контроле указывали на присутствие антител анти-Gm. Антитела к антигенам системы Gm дифференцировали на пластинках, предложенных Laurel и Hoppe и модифицированных Fuenfhausen. Стандартные и испытуемые сыворотки разводили в 4 раза. Каплю испытуемой сыворотки смешивали с каплей стандартной сыворотки группы Gm (a+x+f—) или Gm (а—х—f+), или Gm (а+х—f+). Через 8—10 мин. добавляли каплю 5% взвеси сенсибилизированных эритроцитов группы ORh+ и снова смешивали. Пластинки помещали во влажную камеру и оставляли в рефрижераторе на 1,5 часа. По истечении указанного срока реакцию задержки агглютинации учитывали невооруженным глазом при легком покачивании пластинки (табл. 1).

После установления специфичности выявленных антител анти-Gm сыворотки проверяли с большим количеством образцов (от 10 до 14) стандартных сывороток для подтверждения полученного результата. Сыворотку № 50 (анти-Gm^x) исследовали с 26 стандартными сыворотками, параллельно с сывороткой анти-Gm^x, любезно присланной нам проф. Prokop. Результаты исследования с обеими сыворотками полностью совпали.

Таблица 1

Дифференцирование полученных сывороток

Примечание. Стандартные сыворотки — сыворотки с известной сывороточной группой; + наличие агглютинации, — задержка агглютинации.

Изучили сыворотки 44 475 доноров и только у 4 обнаружили пригодные для работы антитела: у 3 анти-Gm^a с титром 1:4 и у одного анти-Gm^x с титром 1:64.

Далее исследовали сыворотки 92 лиц, страдающих различными заболеваниями, получивших многократные трансфузии крови. Антитела анти-Gm у них не обнаружили.

Из исследованных сывороток 606 людей, страдающих ревматизмом лишь в сыворотке у 1 были обнаружены антитела анти-Gm^a. Среди 445 сывороток больных детей выявлена одна сыворотка анти-Gm^х (табл. 2).

Полученными сыворотками анти-Gm^a №70 и анти-Gm^x № 50 мы изучали распределение антигенов Gm(a) и Gm(x) у населения Москвы. С этой целью исследовали сыворотки крови 531 донора Городской станции переливания крови.

Таблица 2

Выявление антител к антигенам системы Gm в сыворотках крови людей

Таблица 3

Частота антигенов Gm (а) и Gm (х) у населения Москвы

Сыворотки анти-Gm^a применяли в неразведенном виде, a анти-Gm^x разводили в 10 раз.

Реакцию задержки агглютинации осуществляли на пластинках. Результаты были отчетливые (табл. 3).

Таблица 4

Распределение сывороточных групп у населения Москвы

Полученные данные о частоте антигена Gm(a) согласуются с данными М.А. Умновой с соавторами. У тех же 531 человека установили группы системы Gm (табл. 4).

Выводы

1. Антитела к антигенам системы Gm в сыворотках крови людей встречаются редко. При исследовании сывороток 44 475 доноров было найдено 3 сыворотки анти-Gm^a и 1 сыворотка анти-Gm^x, пригодные для работы. Среди 445 сывороток больных детей обнаружена 1 сыворотка анти-Gm^x. Из 606 сывороток больных ревматизмом выявлена 1 сыворотка анти-Gm^x.
2. Из 24 сывороток анти-D и анти-CD с неполными антителами, пригодными для сенсибилизации эритроцитов, оказалось 3 сыворотки: 1 для работы с сыворотками анти-Gm^a и анти-Gm^х, 2 — только для сыворотки анти-Gm^a.
3. На основании данных исследования сывороток 531 донора установлено, что частота антигена Gm (а) равна 37,1%, антигена Gm (х) — 9,6%.