Характеристика активности зон ядрышковых организаторов рибосом в оценке эффективности консервативного лечения рака простаты

Введение:

Оценка эффективности лечения рака простаты (РПЖ) является сложной проблемой [1,3]. Общепринятым способом оценки эффективности лечения рака предстательной железы (РПЖ) является динамическое наблюдение с проведением повторных комплексных обследований, включающих изучение динамики симптомов заболевания, данных ультразвукового исследования, оценку уровня ПСА, щелочной и кислой фосфатазы. Прогрессирование РПЖ при консервативном лечении во многом связано с развитием гормонорезистентного рака простаты [2,5], диагностика и прогнозирование которого весьма затруднительны, несмотря на существование множества методов обследования при РПЖ. Это, наряду с другими причинами, обусловливает большую частоту неудач в лечении РПЖ. Поэтому разработка новых методов, расширяющих возможности традиционной диагностики в прогнозе и оценке эффективности лечения РПЖ является актуальной. В этой связи были исследованы возможности компьютерной морфометрии зон ядрышковых организаторов (ЯОР).

Материалы и методы:

Исследованы биоптаты простаты 90 пациентов, полученные в результате 179 биопсий при диагностике РПЖ и в различные сроки от начала консервативного лечения. Материал фиксировали в 10% растворе формалина и заливали в парафин по стандартной методике. Депарафинированные и регидратированные срезы для выявления ядрышковой активности окрашивали 50% раствором AgNOr После гистологической верификации диагноза, включавшей также определение степени дифференцировки по системе Глисона, проводили компьютерный морфометрический анализ ядерно-ядрышкового аппарата с помощью анализатора изображений «Мекос». Морфометрическому анализу подвергали наиболее соответствующие для данной патологии зоны препаратов.

Результаты и обсуждение:

Полученные при морфометрическом анализе результаты были оценены согласно ранее разработанной в ДВГМУ морфометрической классификации гистотипов эпителия простаты (табл. 1), [4].

Согласно классификации эпителий подразделен на 6 гистотипов. При этом 1 гистотип условно соответствует неизмененному эпителию, 2 — ПИН невысокой степени, 3 — ПИН высокой степени, 4 — аденокарциноме низкой злокачественности, 5 — аденокарциноме умеренной злокачественности, 6 гистотип — аденокарциноме с признаками высокой злокачественности.

При анализе морфометрических показателей обращает внимание их непрерывное возрастание при переходе от ниже — к вышестоящему гистотипу, причем наиболее информативными, на наш взгляд, являются изменения значений суммарной площади ЯОР и их дисперсии. Более наглядно это демонстрирует динамика изменений отношения дисперсии

Таблица 1. Морфометрические показатели ядрышково-ядерного аппарата эпителия предстательной железы различных гистотипов.

к среднему значению морфометрического признака. Так в случае площади ЯО Р в 1 -3 гистотипах эта величина колеблется от 0,276 до 0,333, а в 4–5 — возрастает почти вдвое, составляя 0,702 и 0,642 соответственно. Более значительно возрастание этой величины (1,499) в 6-ом гисто- типе. Несколько менее выраженную, но тем не менее сходную динамику демонстрирует и отношение дисперсии площади ядер к их среднему значению. На наш взгляд это является количественным выражением возрастания полиморфизма ядерно-ядрышкового аппарата в ходе малигнизации ткани.

Проведен анализ морфометрических данных, полученных при первичной диагностике РПЖ. Изучена их связь со степенью дифференцировки РПЖ, оцененной по системе Глисона. Данные представлены в табл. 2.

Обращает внимание, что увеличение числа Глисона соответствует увеличению среднего значения гистотипа в выборке и возрастанию морфометрических показателей при снижении дифференцировки опухоли. Так, при наличии числа Глисона 3–4 среднее значение гистотипа было в диапазоне 3 ± 1,96 и 3,77 ± 0,31, а при Глисон 8–10 соответственно

5,5 ± 0,56 и 6 ± 0. Для оценки силы связи между признаками проведен корреляционный анализ. При этом выявлено наличие средней связи между числом Глисона и активностью ЯО Р (r = 0,61, р < 0,05, t = 7,37). Однако в пределах каждой из степеней дифференцировки, оцененной по Глисону колебания активности ЯОР находились в широком диапазоне. Например, при числе Глисона 4 определялись гистотипы в интервале от 2 до 5, при Глисон 6 - от 3 до 5, при Глисон 8 от 5 до 6.

Таблица 2. Соотношение морфометрических гистотипов и степени дифференцировки опухоли.

После того, как была изучена исходная характеристика ЯОР, оценена ее динамика в различные сроки от начала консервативного лечения РПЖ (табл. 3).

Таблица 3. Изменение активности ЯОР в зависимости от срока лечения

Примечание: расчет p u t — относительно исходных данных.

При этом выявлено отсутствие изменения активности ЯОР через 1 месяц (р>0,8) и ее снижение через 3 месяца (с 4,08±0,22 до 3,3±0,39), которое однако не было достоверным (р<0,1). Статистически значимое снижение активности ЯОР отмечено между 3 и 6 месяцами от начала лечения: снижение среднего значения гистотипа с 4,08±0,22 до 2,69±0,32 (р<0,0001). Повышение активности ЯОР через 12 месяцев было обусловлено прогрессированием РПЖ на фоне перерыва в лечении при медикаментозной МАБ. Таким образом, клинически значимое снижение активности ЯОР отмечается в сроки от 3 до 6 месяцев от начала лечения.

С целью решения вопроса о возможности применения ЯОР в качестве критерия эффективности лечения РПЖ, проведен анализ гистологического материала, полученного в результате 33 повторных биопсий через 6 месяцев от начала лечения РПЖ. У всех пациентов клинико-лабораторные данные свидетельствовали о наличии положительной динамики в ходе проводимого лечения. Больные разбиты на 2 группы по признаку снижения активности зЯО (уменьшение гистотипа). В целом снижение активности ЯОР отмечено в 24 (72,7%) наблюдениях и отсутствовало в 9 (27,3%) В обеих группах оценена частота развития прогрессирования, устойчивого к последующему проводимому лечению в сроки до 12 месяцев (табл. 4).

Таблица 4. Соотношение изменения активности ЯОР через 6 месяцев от начала лечения с последующей эффективностью проводимого лечения (n=33)

Примечание: * — число больных с последующим неэффективным лечением статистически достоверно отличается от больных с эффективным лечением в зависимости от снижения активности ЯОР, ч2=4,712 при р<0,03

Подученные данные демонстрируют, что в группе наблюдений, где отсутствовало снижение активности ЯОР, при последующем наблюдении в течение 6 месяцев у 5 (55,6%) из 9 пациентов отмечено развитие прогрессирования опухолевого процесса, резистентного к последующему проводимому гормональному лечению (ГРРП). В то же время в группе со снижением активности ЯОР такие наблюдения отмечены в 1 (4,17%) из 24 случаев (ч2=4,712 при р < 0,03). Все это позволяет выделить пациентов с отсутствием снижения активности ЯОР в группу риска по развитию ГРРП.

Выводы:

Исходя из полученных данных, уменьшение активности зон ядрышковых организаторов рибосом может использоваться в качестве дополнительного критерия эффективности лечения РПЖ. Пациенты с отсутствием снижения активности ЯОР, несмотря на положительную динамику клинико-лабораторных и объективных данных могут рассматриваться как группа с недостаточно эффективным лечением и риском развития ГРРП. Однако для уточнения нашего предположения и оценки зависимостей от видов лечения требуется более продолжительное наблюдение.

Литература:

1. 1. Зубков А.Ю., Ситдыков Э.Н.. Ситдыкова М.Э. // Мат-лы Всеросс. научно-практ. конф. Уфа, 2001г. С. 51 - 52.
2. 2. Каприн А.Д., Гафанов Р.А., Костин А.А. Мат-лы X Российского съезда урологов. Москва, 2002 г. С. 434 - 43 5.
3. 3. Сивков А.В., Алфимов А.Е., Имамов О.Э. // Урология. 1999. № 5. С. 33 - 39.
4. 4. Цыганков В.И., Петричко М.И., Мельникова Н.П. и др. // Мат-лы Всеросс. научно-практ. конф. Уфа, 2001 г. С. 109 - 110.
5. 5. Daneshgari R, Crawford E.D.I! Cancer 1993; 71:1089–97.